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タンパク質へのKsantoproteinovaya反応：徴候や式の方程式

タンパク質へのksantoproteinovaya反応を使用し、多くの食品の定性的な構図を確立するために。混合物中の芳香族アミノ酸の存在は、陽性試験サンプルの色に変化します。

タンパク質とは何ですか

また、生体のための建築材料であるタンパク質を、と呼ばれています。タンパク質は、筋肉のサイズを維持する様々な臓器の負傷者と死んだ組織構造を復元し、それは髪、皮膚や靭帯こと。参加して、赤血球を生成し、多くのホルモンおよび免疫系細胞の正常な動作によって支配されます。

これは、6〜10 ³ダルトンより大きい質量を有するポリペプチドである複合体分子です。タンパク質構造は、結合されたペプチド結合の多数のアミノ酸残基を形成します。

タンパク質の構造

低分子量のペプチドと比較して、これらの物質の特徴は、それらが、三次元空間構造を開発引力の変化度の効果をサポートすることです。タンパク質は、4-構造を有しています。それらのそれぞれのために独自の特性を持っています。

タンパク質へksantoproteinovaya反応を認識するアミノ酸配列由来分子の一次組織の基本構造として。この構造は、周期的に繰り返されるペプチド結合-HN-CH-CO-、選択部基は、アミノ酸中の側鎖です。彼らは、全体として、物質の更なるプロパティを定義します。

一次タンパク質構造が十分に強いと考えられる、これはペプチド結合で強い共有結合性相互作用の存在によるものです。後続のレベルの形成は、初期に設定された属性に応じて発生します。

二次構造の形成により、水素結合がターンの間に確立された螺旋状にアミノ酸配列のねじれすることが可能です。

水素、ジスルフィド、共有結合またはイオン性化合物と、それらの間の全ての可能な接続の発生と他のフラグメント上の螺旋のいずれかを適用することによって形成される分子の三次レベルの組織。結果は、小球の形で関連です。

それらの間の化学結合の形成を伴う三次構造の空間的配置は、分子または第四レベルの最終形態の形成をもたらします。

アミノ酸

彼らは、タンパク質の化学的性質を引き起こします。異なる順序でポリペプチドを構成する約20の主要なアミノ酸があります。これは、基本的なペプチド由来フォームヒドロキシプロリンとヒドロキシリシンで珍しいアミノカルボン酸と呼ばれます。

認識ksantoproteinovayaタンパク質反応の兆候として、特定のアミノ酸の存在は、その組成物中の特定の構造の存在を示唆し、試薬の色の変化を提供します。

それが判明したように、彼らは、アミノ基上の水素原子の置換を発生しているカルボン酸です。

分子の構造例は、役立ち得る構造式最も単純なアミノ酸としてグリシン（HNH- HCH- COOH）を。

この場合、水素CH ₂の一方が-ベンゼン環、アミノ、スルホ、カルボキシ基を含む長い炭素ラジカルで置き換えられてもよいです。

ksantoproteinovaya反応は何が

様々な技術を用いて、タンパク質の定性分析のために。これらは、反応を含みます：

紫色の外観を有するビウレット。
ニンヒドリンは、青紫色の溶液を形成します。
赤色の確立ホルムアルデヒド;
Nogierグレー黒色を沈殿させます。

各方法を実施中のタンパク質の存在および分子中に特定の官能基の存在を証明しました。

タンパク質に対する反応がありksantoproteinovaya。また、故障モルダーと呼ばれています。これは、芳香族及び複素環式アミノ酸存在するタンパク質の呈色反応を指します。

そのようなサンプル処理の特徴は、ニトロ化である酸硝酸特に環状アミノ酸残基は、ベンゼン環へのニトロ基のアク。

このプロセスの結果は、沈殿したニトロ化合物の形成です。これは、基本的な機能のksantoproteinovaya反応です。

どのようなアミノ酸を決定

すべてのアミノカルボン酸は、そのようなサンプルを用いて検出することができません。 ksantoproteinovayaタンパク質検出反応の主な特徴 - 分子アミノ酸中のベンゼン環又は複素環の存在。

タンパク質は、（フェニルアラニン）フェニル基、（チロシン中）ラジカルヒドロキシが存在する二つの芳香族アミノカルボン酸、から隔離されているからです。

ksantoproteinovaya反応は、芳香族核を有する複素環式アミノ酸のトリプトファン、インドール決定されると。タンパク質中の上記化合物の存在は、試験環境の特徴的な色の変化を与えます。

どのような使用の試薬

反応を行うための卵タンパク質、または植物由来の1％溶液を準備する必要がありksantoproteinovaya。

通常、卵黄からのタンパク質のさらなる分離のために分割された卵を、使用していました。タンパク質の1％溶液のために精製された水の10倍の量で希釈しました。得られたタンパク質液の溶解後にチーズクロスの複数の層を通して濾過しなければなりません。このソリューションは、涼しい場所に保管してください。

植物性タンパク質との反応を行うことが可能です。溶液を調製するために0.04キロの量の小麦粉を用いています。精製水0.16リットル。成分は、約+ 1℃の温度で、涼しい場所で24時間結ばれたフラスコ中で混合しました紙折り畳まれたフィルタ - 一日の終わりに、溶液を、次いで、綿ウールとで、その第1濾過し、撹拌しました。得られた液体は、涼しい場所に保管されました。この溶液は、アルブミン画分に主に存在します。

硝酸濃塩酸を使用主試薬として反応ksantoproteinovayaを行うため。さらなる試薬は、10％の水酸化ナトリウム又はアンモニア、ゼラチン溶液と未濃縮フェノールの溶液です。

の方法論

清浄なチューブに2ミリリットルの量の卵や小麦粉番目の1％のタンパク質溶液なります。凝集停止し、これに濃硝酸約9滴を添加します。得られた混合物を徐々に消え、その色が溶液になる黄色の沈殿物を得、加熱しました。

液体は壁に沿ってチューブ内で冷却する場合の約9滴を加え、水酸化ナトリウムを処理するための過剰である、濃縮しました。反応媒体をアルカリ性になります。コンテンツは、試験管内でオレンジ色になります。

の特長

ksantoproteinovayaは、タンパク質の作用によって硝酸に定性的な反応と呼ばれているので、サンプルが含ま下で行われるヒュームフード。濃苛性物質を扱う場合、すべての安全上の注意事項を守ってください。

チューブからの内容物の放出は、ホルダーにそれを固定して傾きを選択する際に考慮しなければならない加熱処理中に発生し得ます。

濃硝酸及び苛性ソーダのダイヤルは、口からガラスピペットと梨ゴム禁止ピペットを使用しなければなりません。

フェノールとの相対的な反応

明瞭さ、プロセス及びフェニル基の存在を確認するための同様のサンプルヒドロキシベンゼンを用いて行われます。

希釈されたフェノールの2mLのを作るチューブが、徐々に壁に沿って、濃硝酸を2mlを加えました。溶液は、それが黄色になることにより、加熱に供しました。この反応は、ベンゼン環の存在の品質です。

プロセスヒドロキシベンゼンは15〜35の割合でp-ニトロフェノール及びo-ニトロフェノールの混合物を形成し、続いて硝酸でニトロ化。

ゼラチンとの比較テスト

タンパク質へのksantoproteinovaya反応は芳香族構造を有するアミノ酸が明らかに証明するために、フェノール基を有していないタンパク質を使用します。

清浄なチューブに2ミリリットルの量の1％ゼラチン溶液とします。これに、濃硝酸約9滴を添加します。得られた混合物を加熱します。溶液は芳香族構造を有するアミノ酸が存在しないことを証明した、黄色に着色されませんでした。時には、タンパク質不純物の存在に起因する環境のわずかな黄変があります。

化学反応式

2回の段階反応でksantoproteinovayaタンパク質が実行されます。式初段ニトロ化プロセスは、濃硝酸を用いたアミノ酸分子を記載しています。

例は、ニトロチロシンおよびdinitrotirozinaを形成するチロシンのニトロ基の結合です。ベンゼン環の第一のケースは、1つのNO ₂ -基が結合されているに、そして第二の化合物2個の水素原子がNO ₂によって置換されています_。ニトロチロシン分子を形成するために、硝酸との反応により表される化学式ksantoproteinovayaチロシン反応。

ニトロ化プロセスは、黄色のトーンで推移無色の発色を伴っています。アミノ酸を含むタンパク質でこの反応を行う際に、フェニルアラニンまたはトリプトファン、および溶液の色が変わり残基。

第二のステップは、アンモニウムまたは水酸化ナトリウムで、特にニトロチロシン、チロシン分子のニトロ化の反応生成物です。結果は、黄色、オレンジ色のナトリウムまたはアンモニウム塩です。そのような反応は、ニトロチロシン分子の可能性に関連してキノイド形態で移動します。続いて、共役二重結合のキノン系を有するnitronic酸、そこから形成される塩。

このようにタンパク質にksantoproteinovaya反応を終了します。第二工程上記の方程式。

結果

3本のチューブに含まれる流体の分析の間に、参照溶液をフェノールで希釈します。ベンゼン環を有する物質は、硝酸と定性反応を与えます。その結果、溶液の色を変化させます。

知られているように、ゼラチンはコラーゲンの加水分解された形態を含みます。タンパク質はアミノ酸の芳香族構造が含まれていません。酸との反応による媒体の色の変化なし。

第三の試験管内タンパク質ksantoproteinovayaに陽性反応があります。芳香族構造を有するすべてのタンパク質、それは溶液の色の変化所与フェニル基、インドール環、であるかどうかを次のように結論を引き出すことができます。これは、黄色を有するニトロ化合物の形成によるものです。

呈色反応を行うと、アミノ酸及びタンパク質における様々な化学構造の存在を証明しています。例えば、ゼラチンは、その組成がフェニル基又は環状構造を有していないアミノカルボン酸を含むことを示します。

それに強い硝酸を適用した場合ksantoproteinovaya反応で皮膚の黄変によって説明することができます。同じ色は彼女の同様の解析中に泡状のミルクとなります。

臨床実習では、このカラーサンプルは、尿中のタンパク質の検出に使用されていません。これは、尿自体の黄色の色によるものです。

Ksantoproteinovaya反応は、種々のタンパク質の一部として、そのようなトリプトファンおよびチロシンのようなアミノ酸の定量のために、ますます使用されるようになりました。